HBA-тест: что это, правила подготовки к сдаче теста

Особенности исследования

HBA-тест может быть индикатором успешного оплодотворения. Многими исследованиями было подтверждено, что эякулят, отобранный с помощью HBA-теста для проведения ИКСИ (метод экстракорпорального оплодотворения), был намного лучше за счет следующих особенностей:

• Сперма содержала в 4-6 раз более низкую частоту хромосомных аномалий при HBA-тесте по сравнению с другими тестами.
• Более чем 99% гамет, связанных с гиалуронатом HBA-теста, имели высокую степень целостности ДНК. При этом в сперме, исследованной другими тестами, 55% сперматозоидов были нормальными, а остальные имели фрагментированный вариант ДНК.
• Определены более низкие уровни креатинфосфокиназы при использовании HBA-теста.
• Более высокие уровни белка HspA2 при HBA-тесте.

Процедура

НВА-тест проводится как самостоятельная процедура или параллельно со спермограммой. Спермограмма позволяет оценить качество сперматозоидов и их плотность в отдельной пробе. Благодаря методу, получается, изучить морфологические особенности сперматозоидов конкретного мужчины, и оценить их способность к взаимодействию с защитной оболочкой яйцеклетки.

Процедура проведения НВА-теста отдельно от сперматограммы подразумевает такую же подготовку, которая включает:

• воздержание в течение 2-3 дней;
• отсутствие простудных заболеваний и повышенной температуры;
• отсутствие переохлаждений или перегреваний организма мужчины перед исследованием;
• отказ от принятия химических препаратов и алкоголя перед проведением исследования.

Результат

Индекс связывания рецепторов головки спермия с гиалуроновой кислотой 60-80%. Данный результат означает, что половые клетки мужчины имеют достаточную способность к оплодотворению. В случае подобного результата возможно удачное естественное оплодотворение. Риск развития клеточных аномалий и отсутствия зачатия минимален.

Индекс связывания рецепторов головки спермия с гиалуроновой кислотой менее 60%. Качество эякулята низкое, сперма не способна к естественному оплодотворению, сперматозоиды низкого качества или незрелые. Такой результат может свидетельствовать о мужском бесплодии.

Зачатие новой жизни – уникальный природный процесс. При эякуляции в половые пути женщины попадает в среднем 50 млн. сперматозоидов, через шейку матки к яйцеклетке добираются всего 90-100, а оплодотворяет только один, лучший из лучших! Даже небольшая помеха на этом сложном пути может помешать наступлению беременности. К счастью, безвыходных ситуаций, связанных с бесплодием на сегодня осталось совсем мало. В большинстве случаев репродуктология имеет в своем арсенале множество различных технологий и способов решения проблем с зачатием. Наиболее доступным способом является внутриматочная инсеминация.

Внутриматочная инсеминация (ВМИ) – введение подготовленной спермы в полость матки. Подготовка заключается в том, что в условиях лаборатории сперму «отмывают», делают более концентрированной и удаляют белковые фракции. Этот метод наиболее приближен к природному оплодотворению, при котором вмешательство в организм женщины минимальное. Проведение внутриматочной инсеминации не требует большого количества медикаментов, как часто бывает при экстракорпоральном оплодотворении (ЭКО). Кроме того данный метод достаточно прост и относительно доступен.

В наиболее благоприятный для зачатия период (овуляция) подготоваленную сперму вводят в полость матки; далее оплодотворение осуществляется естественным путем в маточной трубе. Проведение ВМИ возможно как в природном цикле, когда дозревает одна яйцеклетка, так и при стимуляции роста фолликулов.

Сдача спермограммы, готовимся правильно:

• воздержание от половых контактов на протяжении 2-3 дней;
• ограничение (или отказ) от курения;
• отказ от алкоголя;
• исключение из рациона острых блюд;
• по возможности, отказаться от приема медикаментов;

Также нельзя посещать сауну, баню и другие тепловые процедуры. Даже подогрев сидения в автомобиле может исказить результат исследования.

Что влияет на результат ВМИ

Наступление беременности в результате ВМИ зависит от нескольких факторов:

• возраста женщины;
• срока бесплодия;
• качества спермы;
• количества предыдущих попыток инсеминации и т.д.

Шансы на успех составляют, в среднем, 10-15%, после 4-5 неудачных попыток рекомендуется проведение ЭКО.

Довольно часто встречаются ситуации, когда показатели спермограммы в норме, а результат не достигнут даже с n-ной попытки. В таких случаях незаменимым помощником будет HBA-тест.

Это исследование можно проводить параллельно со спермограммой. HBA-тест позволяет определить индекс зрелости сперматозоидов, отсутствие ДКК-фрагментации. Принцип проведения анализа базируется на использовании гиалуроновой кислоты, которая является главным компонентом окружающего яйцеклетку кумулюсного комплекса. Мембрана зрелого сперматозоида обязательно несет рецепторы связывания с гиалуронатом. Связавшиеся сперматозоиды теряют прогрессивную подвижность, не смотря на частые колебания, в то время как незрелые сперматозоиды продолжают двигаться беспрепятственно.

В практическом опыте насчитывается уже несколько случаев наступления беременностей после ИКСИ после 2-3 неудачных попытках ВМИ в анамнезе. Таким образом, результат не вызывает сомнений – проведение HBA-теста имеет практическую ценность.

Показатели здоровой спермы и ее зрелости

Помимо параметров, определяемых при анализе нормальной спермограммы, существуют и другие маркеры здорового эякулята. Данные маркеры определяются также при HBA-тесте.

1. Включения цитоплазмы. При конечном формировании половых клеток в нормальных условиях лишняя цитоплазма выходит наружу. Если есть дефекты в нормальном развитии, это может привести к избыточным включениям цитоплазмы вблизи головки половых клеток. Данное нарушение можно выявить с помощью микроскопа с высоким разрешением.
2. Уровень креатинфосфокиназы спермы. В исследованиях было показано, что повышенный уровень креатинфосфокиназы связан с нарушением функции спермы и снижением наступления беременности.
3. Белок HspA2. Данный белок в больших количествах содержится в нормальных гаметах. У клеток с низким уровнем белка вероятнее всего имеются фрагментация ДНК и хромосомные аномалии.

Показания и противопоказания к мар тесту

Обычно mar-тест назначают в ситуациях непонятных причин бесплодия при:

• подозрении на мужской фактор бесплодия;
• планировании беременности (если есть подозрение на аутоиммунное бесплодие или бесплодие по невыясненной причине);
• агглютинации сперматозоидов при спермограмме;
• после операций на половых органах;
• исследовании репродуктивной мужской системы после отягчающих факторов (травм, операций, инфекций);
• подготовки к процедурам вспомогательных техник оплодотворения (ЭКО, ИКСИ).

Иногда подобное исследование произвести невозможно. Противопоказан мар тест при отсутствии или малом количестве сперматозоидов в эякуляте.

Суть теста

Исследование направлено на выявление рецепторов, находящихся на головке сперматозоидов, необходимых для связки с яйцеклеткой.

Каждая яйцеклетка, которая созрела к оплодотворению, имеет защитную оболочку. В состав защитной оболочки входит гиалуроновая кислота, с которой сперматозоид связывается с помощью рецепторов головки, без связки внедрение в яйцеклетку невозможно. Зрелый сперматозоид имеет большую плотность рецепторов на своей головке, которые позволяют ему проникнуть в женскую яйцеклетку. Незрелые сперматозоиды должны пройди дифференциацию, в ходе которой происходит перестройка мембран, созревание ядра и отделение цитоплазмы. При недостаточном уровне перестройки мембраны, связи гиалуроновой кислоты и рецепторов головки сперматозоида не происходит, что не позволяет спермию проникнуть в яйцеклетку и передать ей свой генетический материал. В результате оплодотворение невозможно.

НВА-тест применяется

• При диагностировании причин бесплодия;
• При ряде неудачных процедур ЭКО;
• При получении эмбрионов низкого качества;
• Для выбора необходимой процедуры вспомогательной репродуктивной технологии (ВРТ), благодаря этому шанс удачного оплодотворения повышается. К методам ВРТ относят: ПИКСИ, ЭКО и ИКСИ.

Нормы спермограммы

Показатель	Норма
Оценка спермы
Время разжижения	10–60 минут
Объем	2,0–6,0 мл
Водородный показатель (рН)	7,2–8,0
Цвет	бело-сероватые, молочные, желтоватые цвета спермы
Количество спермиев в эякуляте	40–500 млн
Лейкоциты	не больше 1 млн/мл
Эритроциты	нет
Слизь	отсутствует
Оценка сперматозоидов
Концентрация (количество спермиев в 1 мл)	20–120 млн/мл
Активноподвижные (категория А)	более 25%
Слабоподвижные (категория В) A+B	более 50%
Слабоподвижные (категория С)	менее 50%
Неподвижные (категория D)	не более 6–10%
Правильная морфология	более 50%
Агглютинация	нет
MAR-тест	менее 50%

Некоторые полагают, что нормоспермия и нормозооспермия — это одно и то же. На самом деле это не так. При нормозооспермии некоторые показатели, такие как разжижение эякулята, рН или вязкость, могут незначительно отклоняться от нормы. Это не влияет на оплодотворение.

Спермограмма правила сдачи

По рекомендации ВОЗ (Всемирной организации здравоохранения) сдача спермограммы должна проводиться путем мастурбации, а не с помощью прерванного полового акта или другим способом. Чтобы сдать анализ спермы, в лаборатории оборудуют специально отведенную комнату. Дверь в ней закрывается изнутри. Чтобы легче было сдать анализ эякулята, в комнате имеются журналы эротического содержания.

Если вам назначена спермограмма, правила сдачи предполагают 3–4 дневную подготовку:

• не пить алкогольные напитки, в том числе пиво;
• не заниматься сексом;
• не посещать сауны, бани, а также не принимать горячих ванн.

Повторная сдача спермограммы предполагает выполнение тех же правил.

Чтобы правильно оценить результаты спермограммы, необходимо сдать ее несколько раз. Если после первой сдачи спермограммы врач сказал, что спермограмма плохая, не отчаивайтесь. При повторном анализе сперма может иметь другие характеристики. Изменение этих характеристик может в целом повлиять на трактовку расшифровки спермограммы.

Причина аутоиммунного бесплодия

Почему же организм может противостоять наступлению беременности? Общеизвестно, что иммунная система призвана охранять наш организм. Активно участвует она и в процессе зачатия.

Половые клетки отличаются от обычных клеток вдвое уменьшенным количеством хромосом: в сперматозоидах их всего 23. Поэтому организм склонен рассматривать сперматозоиды в качестве чужеродных клеток, которые нужно уничтожать.

Существует два вида иммунологического бесплодия: иммунное и аутоиммунное.

При иммунном бесплодии женский организм реагирует выработкой антител на сперматозоиды партнера в своем лоне. Происходит это при повреждении оболочки женских половых органов, когда происходит тесное соприкосновение сперматозоидов с кровеносной системой половой сферы. Причинами этого вида нарушения часто становятся травмы половых органов, эрозии или воспалительные заболевания у женщин.

При аутоиммунном бесплодии организм мужчины сам производит антитела, повреждающие собственные сперматозоиды. В норме сперматозоиды окружены барьером, не позволяющим их распознавать и повреждать. Однако по ряду причин этот барьер нарушается и происходит выработка антител, направленная на сперматозоиды. Такие антитела покрывают сперматозоиды, что приводит к их склеиванию и замиранию. При этом половые клетки мужчины становятся неспособными проникнуть через цервикальную жидкость вовнутрь яйцеклетки и обеспечить успешное зачатие. При исследованиях АСАТ можно обнаружить и в крови, и в сперме. Подобные сбои возможны при инфекционных поражениях мужской половой сферы, травмах, кистозных трансформациях.

При назначении мар-теста важно уточнить, у кого из супругов врач подозревает выработку антиспермальных антител и каковы причины этого сбоя.

Подготовка

Чаще всего mar-тест производят со спермограммой в один день, с одного и того же образца спермы.

Для достоверного анализа важно соблюдать такие правила подготовки:

Для мар-теста используется эякулят от мастурбации. Сперма после полового акта не пригодна для исследования.
При приеме гормонов позднее полгода до исследования, результаты анализа могут быть искажены.
За 10 дней до теста исключается посещение сауны или бани.
При лечении воспаления половой сферы анализ на мар-тест не проводится. А за 7 дней до анализа исключается использование любых препаратов или БАДов.
Исключается контакт с токсичными веществами за 2-3 дня до исследования (при работах во вредных условиях, контакте с химикатами и др.).
Исключается применение острой и жирной пищи.
Необходимо воздержание от сексуальных контактов за неделю до сбора материала. Это необходимо для исключения присутствия клеток женской половой сферы.
Обеспечение покоя и исключение любого перенапряжения за сутки до исследования.
Исключение алкоголя за неделю и курения за 3-4 часа до анализа.
Организация полноценного сна за сутки до анализа.
Если мужчина переболел ОРВИ или гриппом, тест не проводят до его полного выздоровления.
Перед сдачей спермы необходимо помочиться и помыть половые органы с мылом
При мастурбации нельзя применять смазку или использовать презерватив.
Особое внимание уделяется вопросу сбора материала для теста

Сперму собирают в стерильный контейнер
При этом важно доставить материал в лабораторию не позже, чем через час после его сбора (особенно при сборе анализа на дому). Иначе результат будет недостоверным.
Запрещено переохлаждать или перегревать контейнер со спермой

Оптимальной температурой для транспортировки семенной жидкости является температура тела. При этом нельзя допускать попадания прямых лучей солнца на контейнер.
Ответ анализа можно узнать на следующий день после его сдачи. Достоверность результата обычно подтверждается через 2 недели в виде повторного исследования.

Отличие мар-теста от спермограммы

Причины мужского бесплодия бывает трудно диагностировать. И если при этом «корень зла» кроется в иммунологических проблемах, то спермограмма при подобных отклонениях может быть абсолютно нормальной. Обнаружить в эякуляте антиспермальные антитела, являющиеся основной иммунологической причиной бесплодия, может лишь мар тест. Иммунологические нарушения приводят к бесплодию в 10-20 % случаев, и выявить их другими методами исследований невозможно.

Если сперматозоиды покрыты антиспермальными антителами, они все равно остаются подвижными, однако не могут оплодотворить яйцеклетку.

Скорость передвижения спермиев в этом случае существенно понижена. Особенно затруднено проникновение мужских половых клеток в яйцеклетку, если антитела располагаются на их головке. Одной спермограммы недостаточно для получения полной картины качества спермы, так как она определяет лишь количественный состав эякулята и подвижность спермиев. Поэтому пациентам при бесплодии назначают также мар тест.

Проведение мар-теста у мужчин

Если мужчина планирует сдать mar-тест, ему придется вначале записаться на прием к андрологу в одном из репродуктивных клиник или центров.

Обычно мужчине рекомендуют мар тест, если при расшифровке спермограммы у него были выявлены слипшиеся сперматозоиды (агглютинация).

Мар-тест может быть:

• прямым (когда для исследования берется семенная жидкость);
• непрямым (когда исследуется плазма крови).

Более точным при этом является прямой вид данного теста.

Проведение мар-теста состоит в следующем:

1. Образцы спермы смешиваются с другими клетками (эритроцитами или частицами латекса), покрытыми человеческими антителами (АСАТ).
2. В массу из спермы и эритроцитов (или латексных частиц) добавляют IgG-антисыворотку.
3. Сперматозоиды, покрытые оболочкой из антител, склеиваются с введенными частичками.
4. Производится подсчет склеенных сперматозоидов для определения результата в процентах. Процент деформированных спермиев свидетельствует о наличии бесплодия иммунного характера.

Как разобраться в результатах мар-теста

Самым хорошим считается показатель mar-теста менее 10%. И чем показатель меньше, тем это лучше. Главное, чтобы при данном исследовании был отрицательный результат со значением менее 50%. Подобный результат говорит о том, что спермиев со антиспермальной оболочкой в анализе менее половины. Подобный показатель считается нормальным, так как мужчина с подобной характеристикой спермы имеет нормальный шанс зачать малыша. В тесте такой результат читается как «мар тест – норма».

Если в сперме обнаружили более 50% сперматозоидов с антиспермальными антителами, мар тест считают положительным. Если даже сперматозоиды подвижны, но более 50% их покрыто АСАТ, то такой ответ приравнивается к большой вероятности мужского бесплодия. Подобный диагноз довольно серьезен для пары.

При выработке АСАТ в организме мужчины говорят об аутоиммунном бесплодии. Если же подобные антитела продуцирует женский организм, то бесплодие считают иммунным.

Изучение состояния и роль гиалуроновой кислоты

Для проведения ЭКО, а также диагностики различных нарушений мужского здоровья необходимо исследовать эякулят. Мужские половые клетки должны быть здоровы для последующей имплантации в яйцеклетку в случае ЭКО. Как правило, эякулят отбирают только на основании внешнего вида сперматозоидов под микроскопом. В норме они должны двигаться (что доказывает, что они живы) и иметь нормальную форму. До недавнего времени не было никаких тестов, которые точно говорили бы о здоровье эякулята. Необходимо понимать, что чем более здоровые половые клетки будут использованы для ЭКО, тем более здоровые эмбрионы сформируются, и это улучшит беременность при ЭКО.

Исследования показали, что гиалуроновая кислота является обязательным важным показателем здоровья и зрелости спермы. Ученые доказали, что присоединение сперматозоида к гиалуроновой кислоте, окружающей яйцеклетку, служит естественным механизмом отбора зрелой спермы во время естественного зачатия.

Что делать при положительном результате

Если мар тест дал 100% результат, это скорее всего говорит о невозможности паре забеременеть естественным путем. Однако не нужно отчаиваться при получении даже такого максимально неблагоприятного результата исследования. Благодаря современным техникам беременность и в этом случае вполне возможна.

При положительном результате mar-теста вполне реально использовать вспомогательные репродуктивные техники. Например, применение в подобных ситуациях техник ЭКО или ЭКО+ИКСИ позволяют забеременеть даже при 100% положительному результату.

Хотя подобное исследование спермы пока еще менее известно, чем спермограмма, однако именно мар тест в состоянии выявить иммунологические причины бесплодия. И не стоит отчаиваться, если данный тест будет положительным. Во многих случаях подобный результат не является приговором и поддается коррекции. А при современных возможностях вспомогательных репродуктивных технологий зачатие возможно даже при 100% положительном мар-тесте.

От чего зависит качество спермограммы

Сразу отметим, что, в большинстве своем, результаты анализов не зависят от того, где сделать спермограмму. Следует сказать, что на репродуктивную функцию мужских половых органов оказывает влияние множество факторов, среди которых чуть ли не на первом месте находится стресс. Здесь подразумевается не только непосредственно нервное напряжение, но и токсикологические, инфекционные и физические раздражительности, а также все то, что может вывести организм человека из комфортного состояния. Если следить за своим распорядком дня и минимализировать вредные воздействия, качество спермограммы со временем улучшится самостоятельно, ведь наш организм имеет потрясающую способность к саморегуляции. Для этого необходимо:

• Жить в месте с благополучной экологической обстановкой;
• Заниматься активными видами спорта не реже 3-х раз в неделю;
• Следить за своим питанием;
• Исключить вредные привычки;
• Соблюдать режим работы и отдыха.

Руководствуясь этими простыми рекомендациями, в скором времени общее состояние организма значительно улучшится, а вместе с ним поднимется и качество спермограммы. Если же мужчина и до этого вел здоровый образ жизни, тогда гормональное состояние организма можно улучшить только посредством специальной медикаментозной терапии, которая обеспечивает высокий результат довольно быстро. Однако, по сравнению с «естественными» методами, такой подход дает непродолжительный результат. Когда проводится спермограмма-морфология, оценивается не только подвижность и количество сперматозоидов, но и их внешних вид. Такой анализ позволяет получить точную картину, отражающую состояние репродуктивных органов мужчины.

Как оценивается спермограмма-морфология и что делать, если она показала неутешительные результаты?

Следует сказать, что проведение спермограммы на морфологию проводится, руководствуясь определенными критериями внешнего вида каждого отдельного сперматозоида и их совокупности. Наиболее частыми патологиями, классифицированными Крюгером, являются:

• Макро — и микроголовки;
• Раздвоение головки или хвоста;
• Грушевидная головка;
• Морфологические патологии шейки или головки.

Отнюдь не всегда неутешительные результаты спермограммы морфологии означают патологии детородных органов или нарушение репродуктивной функции. Благо, современная медицина может решить большинство проблем, поэтому для улучшения состояния назначаются специализированные гормональные или поддерживающие препараты, позволяющие быстро увеличить качество спермограммы, что в дальнейшем приведет к желанной беременности и рождению здорового ребенка. Помните, что на мужчине лежит большая ответственность, ведь даже при отличном здоровье у будущей матери, при плохом качестве спермы, вряд ли на свет появится полноценный, здоровый малыш.