Криоконсервация эмбрионов

Виды криоконсервации

Криоконсервация позволяет сохранять яйцеклетки, эмбрионы и сперму для последующего применения в программах лечения бесплодия. Замороженный материал может быть неповрежденным годами, благодаря чему криотехнология приобретает множество возможностей.

Самым эффективным и щадящим способом криоконсервации эмбрионов и половых клеток остается сверхбыстрое замораживание. Такая процедура получила название витрификация. Этот способ позволяет избежать основной опасности замораживания — формирования кристаллов льда, ведь они могут нанести повреждение клетке во время оттаивания.

Криоконсервация эмбрионов

При проведении манипуляции оплодотворения можно получить большее количество эмбрионов, чем нужно для одной подсадки. Тогда по желанию пары их сохраняют. После инкубации в особых средах «насыщенный» криопротекторами эмбрион располагают на носитель. Его мгновенно погружают в жидкий азот. На носителе расположены основные данные клиента. В холодных условиях эмбрион может много лет ждать пробуждения.

Как только наступит необходимое время, эмбрион размораживают. Для этих целей его обрабатывают специальным раствором с носителя и опять окунают в растворы. Это позволит криопротекторам уступить место воде. Таким образом, получается готовый эмбрион, который уже готов к переносу.

Инновационные криотехнологии обладает повышенной эффективность — более 95% всех эмбрионов успешно подвергаются размножению. Частота наступления долгожданной беременности при переносе обработанных эмбрионов не уступает и даже превосходит такие же показатели свежих подсадок.

Криоконсервация яйцеклеток

Витрификация может быть задействована в целях сохранения яйцеклеток – ооцитов

При этом важно понимать, что женские клетки чувствительно реагируют на процесс замораживания. Таким образом, эффективность криоконсервации ооцитов ниже, по сравнению с результатами замораживания эмбрионов

Рассматриваемая манипуляция проводится в следующих случаях:

1. Когда у женщины была диагностирована функциональная недостаточность или надобность удаления яичников (чтобы в дальнейшем успешно родить биологического малыша);
2. Если женщине диагностировали онкологическое заболевание. Перед выполнением химиотерапии и лучевой терапии проводят криконсервацию, так как указанные раннее методы терапии приведут к утрате качества репродуктивных клеток;
3. Когда женщина желает отсрочить момент наступления беременности, при этом не потерять репродуктивный потенциал.

Криоконсервация спермы

Эта процедура остается одной из самых важных составляющих дополнительных репродуктивных технологий. Сперматозоиды отличаются высокой выносливостью и отлично переносят заморозку и разморозку. Благодаря этому удается смело задействовать размороженную сперму для оплодотворения.

Криоконсервация спермы проводят при следующих условиях:

1. Когда мужчине предстоит сложная терапия или когда он работает на вредном производстве.
2. Когда партнер не в состоянии физически находиться в клинике на момент проведения ЭКО или стать «запасным вариантом», если результаты спермограммы не соответствуют требованиям.

Криоконсервация не оказывает пагубного влияния на здоровье будущего ребенка, но есть вероятность, что холодное время года станет его любимой порой.

История развития метода

Итак, что такое крио?По латыни «cryo» означает холод, соответственно криоконсервация—процесс охлаждения клеток и тканей до минусовых температур с целью остановки любой биологической активности и сохранения для будущего использования. Наука криобиология не молодая, ведь еще в 2500 г. до н.э. ранние цивилизации использовали холод в лекарственных целях. Тем не менее, криозаморозка клеток и тканей стало реальностью только в середине 20-го века. Первоначальные усилия по криоконсервации оказались неэффективными из-за недоработанных методов охлаждения, которые приводили к повреждению клеток от образовавшегося льда из-за изменения концентрации растворенных веществ. В 1940-х годах было обнаружено, что глицерин может защитить сперматозоиды от повреждения во время криоконсервации и оттаивания. После испытания в 1953 г были зафиксированы первые роды с использованием криоконсервированной спермы. В 1970-х годах ученые стали модифицировать составы для заморозки, чтобы свести к минимуму ущерб при оттаивании. Криомедицина развивалась, модернизировалась и внедрила методы медленного замораживания с помощью программируемых морозильников, для минимизации формирования внутриклеточного льда. Эти усовершенствования привели к рождению первого малыша в 1984 г из замороженного эмбриона, а уже в 1986 г— из криоконсервированного ооцита.
За последнее десятилетие была разработана альтернатива криоконсервации— усовершенствованная методика витрификация.

Когда нужна криоконсервация эмбрионов

К сожалению, далеко не каждая попытка забеременеть методом ЭКО бывает успешной. По статистике, в среднем беременность наступает и положительно развивается лишь в 30-65% случаев. В случае неудачи женщина вынуждена снова пройти через повторную процедуру стимуляции яичников и пункции фолликулов, которая сопровождается активной гормональной терапией.

Своеобразной страховкой пациентки на случай неудачи может служить замораживание в жидком азоте эмбрионов. Первый ребенок из замороженного эмбриона человека был рожден в 1984 г. в Голландии.

Доказано, что перенос свежих и размороженных оплодотворенных яйцеклеток имеет практически равные шансы на наступление беременности. Конечно, не каждый эмбрион благополучно «переживет» этапы заморозки и разморозки.

Часть эмбрионов (до 30%) разрушается, но оставшаяся часть – это эмбрионы высшего качества, которые могут быть успешно использованы для повторной подсадки. При этом криопротокол, в который включено хранение, разморозка и подсадка – гораздо дешевле, чем новая попытка ЭКО.

И, что немаловажно, криопротокол избавляет от необходимости проведения повторной стимуляции суперовуляции, а значит – снимает чрезмерную медикаментозную нагрузку на женский организм. Криопротокол также рекомендуется пациентам с повышенным риском развития синдрома гиперстимуляции яичников, тяжелые формы которого приводят к серьезным осложнениям вплоть до угрозы жизни

Криопротокол также рекомендуется пациентам с повышенным риском развития синдрома гиперстимуляции яичников, тяжелые формы которого приводят к серьезным осложнениям вплоть до угрозы жизни.

Кроме того, в случае наступления беременности в свежем протоколе и благополучного рождения здорового ребенка, семейная пара имеет возможность через какое-то время прийти за вторым и последующим ребенком. У криоконсервированных эмбрионов не существует «срока годности» в общепринятом смысле.

Время хранения определяет пациент, оплачивая нахождение эмбриона в криобанке заранее

Очень важно помнить, что по завершению оплаченного срока хранения эмбриона пациент должен принять решение о его судьбе. Среди возможных вариантов – продление срока хранения, перенос эмбриона в матку, его утилизация либо же передача эмбриона для донации супружеской паре или для научных исследований

Шансы на наступление беременности при переносе размороженного эмбриона – такие же, как и при подсадке свежего.

Так как для криоконсервации выбирают только эмбрионы хорошего качества и в процессе размораживания выживают «сильнейшие»– шанс забеременеть даже увеличивается.

В нашей клинике используется метод витрификации эмбрионов, который по данным литературы демонстрирует высокий процент успешной беременности – аналогичный стандартному протоколу ЭКО.

Самый частый вопрос, волнующий родителей — а какой ребенок разовьется из криоконсервированного эмбриона? Не будет ли он иметь каких-либо отклонений в развитии? А некоторые семейные пары категорически отказываются от криоконсервации, говоря — не нужны нам эти «замороженные» дети… На этот счет можно сказать только то, что по данным различных исследований дети, рожденные из размороженных эмбрионов, страдают патологиями не чаще детей, рожденных путем естественного зачатия.

Криоконсервация эмбрионов — выдающееся научное достижение в области вспомогательных репродуктивных технологий, которое открывает двери в мир практически неограниченных возможностей зачатия.

Что это такое

Криоконсервация – это безопасное замораживание эмбрионов. Их располагают в жидкий азот, температурный режим которого -196С. Таким образом, затормаживаются все биохимические процессы – эмбрион не развивается, хотя и остается жизнеспособным при его размораживании.

А размороженные эмбрионы можно задействовать для этой же женщины, если она опять хочет стать матерью через некоторое время. Но только ей при нет необходимости опять проходить гормональное лечение и этапы забора яйцеклеток. В этом случае ей поместят размороженный эмбрион в полость матки, выбирая благоприятный для этого период.

Методика заморозки

Витрификация— процесс заморозки с использованием высокой начальной концентрации криопротектора, и ультрабыстрого охлаждения для укрепления клетки в стеклообразном состоянии без образования льда. Криомедицина способна в настоящее время сохранить:

• сперму;
• эмбрионы;
• ооциты;
• ткани яичников.

Криоконсервация происходит следующим способом:
Эмбрион и ооцит на 90% состоит из воды. Чтобы предотвратить образование разрушающего клетки льда, вода должна быть заменена криопротектором (специальное вещество КП). Технически это сложный процесс, ведь полностью сформированный эмбрион (ооцит), как правило, непроницаем для криопротекторов. Воздействие криопротекторов поддерживает дегидратации клетки и уменьшает образование внутриклеточного льда. КП можно разделить на две группы:

1. внутриклеточные / мембранно-пронизывающие (пропиленгликоль, глицерин, этиленгликоль);
2. внеклеточные / мембранно-nonpermeating соединения (сахароза, трегалоза, глюкоза).

Внутриклеточные вещества вытесняют воду через осмотический градиент и частично занимают место внутриклеточной воды, в то время как внеклеточный вещества увеличивает внеклеточную осмолярность, поддерживающую обезвоживание клетки.
Криоконсервация спермы происходит с помощью смешивания приготовленного образца в парах жидкого азота в течение 30 минут.

Шансы и риски при заморозке

Различные исследовательские группы пытаются решить проблему генетических повреждений материала при использовании методики. Криомедицина в будущем имеет большие перспективы, поэтому исследуются различные способы заморозки.
Использование замороженных бластоцист гарантирует успешную беременность в 27-38% случаев. Процент успеха при использовании криошных ооцитов намного меньше, что объясняется их хрупким строением, поэтому при замораживании и оттаивании они генетически повреждаются.
Криоконсервированные яйцеклетки после процедуры имеют более прочный пеллюцид (защитная мембрана) и специалисты рекомендуют хетчинг или оплодотворение методом ИКСИ (интрацитоплазматическая инъекция спермы). Процент успешности цикла после криоконсервации спермы около 17-29%.
Степень успеха имплантации krio эмбрионов /ооцитов зависит от нескольких переменных:

• эффективность процесса замораживания;
• носителей, используемых для витрификации (открытые и закрытые);
• количество и частота проведенных у женщины циклов;
• критерии отбора эмбрионов/ооцитов для замораживания.

Видео: Кому нужна криоконсервация

Криоконсервация эмбрионов плюсы и минусы

В клиниках Москвы регулярно используется метод криоконсервации биологического материала, который заключается в замораживании половых клеток и эмбрионов для сохранения жизненных способностей и биологических свойств на неопределенный период.

Заморозка и хранение клеток осуществляется в жидком азоте при температуре в -196 ⁰С, при которой полностью останавливаются биохимические процессы и деление в клетках.

Перед осуществлением процедуры специалисты России рекомендуют оценить все плюсы и минусы заморозки эмбрионов.

Ключевые преимущества криоконсервации

Криоконсервация половых клеток и зародышей открывает перед парами, которые не могут родить детей, и пациентами с диагнозом бесплодия существенные медицинские перспективы для достижения желаемой беременности.

Использование методов заморозки рекомендуется в случае участия в программах суррогатного материнства, при выполнении циклов ЭКО, а также для снижения рисков возникновения патологических состояний в процессах зачатия.

Заморозка является новым и эффективным методом в клиниках ВРТ, поэтому многолетний опыт репродуктивной медицины позволяет отметить следующие плюсы заморозки яйцеклеток и эмбрионов:

• Перспектива сохранить жизнеспособные и здоровые половые клетки и эмбрионы, а также использовать их в дальнейшем для проведения различных процедур ВРТ;
• Высокий уровень гарантии зачать, выносить и родить здоровое потомство женщинам, вышедшим из репродуктивного возраста;
• Перспектива передачи донорского материала бесплодным парам;
• Возможность осуществления лабораторного контроля качества биологического материала, благодаря чему исключается риск развития патологий и хромосомных нарушений;
• Высокие шансы достижения беременности для женщин с онкологическими заболеваниями уже после прохождения процедур лучевой и химиотерапии;
• Существенное снижение количества медикаментозных стимуляций наступления овуляции, отсутствие необходимости выполнения чрезмерного количества операционного вмешательства в рамках пункции яичников;
• Предотвращение развития синдрома гиперстимуляции яичников.

Основные недостатки криоконсервации

Несмотря на наличие строгих правил и стандартов для проведения процедуры витрификации, существуют определенные минусы криоконсервации.В результате заморозки существует риск потери незначительной части яйцеклеток, сперматозоидов или эмбрионов в результате заморозки и размораживания.

• Потеря объема эмбрионов и половых клеток в момент выполнения технологических этапов витрификации;
• Отсутствие полной гарантии наступления зачатия и беременности, так как после замораживания здоровыми и живыми остаются незначительный процент зародышей;
• Объективные обстоятельства: криоконсервация предоставляет многим женщинам уверенность в том, что она сможет получить беременность в любой удобный момент. Однако по социальным и медицинским причинам бесплодие может стать существенной помехой, даже при условии наличия жизнеспособных ооцитов.

Несмотря на наличие объективных недостатков овосейвинга, процесс хранения эмбрионов не влияет на процесс развития зародыша. Успех в результате использования клеток после размораживания будет зависеть от множества факторов: возраст пациентки, соблюдение схемы медикаментозного лечения, количество используемых образцов, а также риски возникновения осложнений.

Жизнеспособность и здоровье эмбрионов, полученных в результате криоконсервации, не отличается от витальных свойств зародышей, зачатых естественным путем.

Метод криоконсервация эмбрионов

Первая беременность с использованием метода криоконсервация эмбрионов была зарегистрирована в 1983 году. На сегодняшний день частота наступления беременности после ЭКО с использованием замороженных / размороженных эмбрионов около 52%.

Методика криозаморозки

После извлечения яйцеклетки под ультразвуковым контролем и последующим оплодотворением осуществляется перенос полученных эмбрионов в полость матки. Если есть избыток материала отличного качества, врач предлагает его заморозить. Эмбрионы могут быть заморожены на любой стадии развития, как одноклеточный (один день), так и бластоциста (5-6 дней). Как правило, наиболее потенциально жизнеспособные эмбрионы получаются только на стадии бластоцисты. В некоторых случаях, когда необходимо заморозить материал без подсадки (у женщины диагностировано СГЯ, авария, проблемы со здоровьем, стресс и т.д), криоконсервируется весь материал на следующий день после пункции.
Существует два способа:

• Заморозка эмбрионов— классический процесс замораживания с контролируемой скоростью, чтобы медленно охлаждать материал в криопротекторе жидкости (“антифризный” раствор) от температуры тела до -196⁰C.
• Витрификация (альтернативный метод криоконсевации)—это процесс, сочетающий применение концентрированных растворов с быстрым охлаждением для предотвращения образования льда. На данный момент самый надежный и популярный способ заморозки.

Эмбрионы содержатся в специальных меченых пластиковых флаконах или соломке, которые запечатаны до точки замерзания. После того, как эмбрионы заморозили, их помещают внутри промаркированной пробирки, хранящейся в пронумерованных контейнерах в жидком азоте.

Если необходимо разморозить эмбрионы, их достают со специальной тары. Бластоцисты оттаивают при комнатной температуре, что занимает приблизительно от одной до двух минут.

Наиболее важным моментом процедуры оттаивания считается тщательное разведение криопротектора жидкости, чтобы вернуть эмбрион в необходимую среду. Это позволяет возобновить его рост и развитие в лабораторных условиях.

Как только это будет сделано, эмбриолог оценивает размороженный материал на криоповреждения, чтобы определить, подходит ли он для переноса. По статистике, если бластоцист поврежден на 50% или более, нет смысла в его переносе.

Замороженный материал хранят не дальше 10 лет, хотя сами эмбриологи против длительного содержания.
Стоимость криоконсервации зависит от различных факторов: день развития, количество материала, клиника, срок хранения. В среднем цена заморозки эмбриона колеблется от 8 400-11 900 рублей.

Подсадка и возможные риски

Перенос криошек может происходить как в естественном цикле, так и в протоколе со стимуляцией. Все смотрится индивидуально, ведь врач отслеживает рост эндометрия и соответствие гормональных показателей определенному дню.
Если протокол со стимуляцией, то доза препаратов назначается минимальная, и примерно с 3 дня менструального цикла врач через день смотрит ваши показатели.
Подсадка происходит в гинекологическом кресле под контролем УЗИ. После переноса «снежинок» назначается гормональная поддержка (Крайнон, Прогинова, Утрожестан и т.д.), которая продолжается ежедневно до 8-й недели беременности или до отрицательного теста. В некоторых случаях назначают Фрагмин для гемостаза.
Основной проблемой является риск потерять зародыш из-за криоповреждений. Точное число бластоцист, которые не перенесут процесс заморозки-разморозки индивидуально, но, по статистике, пригодными к переносу остаются около 38-52 % от всех замороженных. Ученые предположили, что процесс криопереноса отбраковывает нежизнеспособные эмбрионы, хотя это не было доказано. Кроме этого, витрификация эмбрионов достаточно дорогостоящая процедура, требующая уникального оборудования и материалов, и если клиника сэкономила на них, качество «снежинок» после разморозки может желать лучшего.

Еще одной проблемой криоконсервации считается потенциальный риск врожденных дефектов у детей, полученных из замороженных / размороженных бластоцист. Правда, проведенные исследования не выявили какого-либо существенного увеличения отклонений по сравнению с результатами естественной беременности, но сомнения остаются.

В программе есть свой плюс и минус, но при желании забеременеть стоит рискнуть. Криопротокол отличается от стандартного.
Видео: Подробно про криоконсервацию эмбрионов

Криоконсервация эмбрионов и яйцеклеток в Москве

Витрификация клеток и эмбрионов и правильное их хранение не снижают качество замороженного материала, после разморозки их биологические свойства полностью восстанавливаются.

Показания для криоконсервации ооцитов

• С целью отсрочить материнство на более поздний возраст (38 лет и более).
• На случай тяжелого заболевания или лечения (химиотерапия, облучение), которое может негативно повлиять на фертильность.
• Обнаружение злокачественного новообразования яичников до прохождения лечения.
• Планирование использования собственных яйцеклеток в программах репродуктивных технологий, в частности, суррогатного материнства.

Показания для криоконсервации эмбрионов

• Получение при гормональной стимуляции большего количества жизнеспособных эмбрионов, чем будет перенесено в свежем цикле ЭКО.
• Если эндометрий не готов для переноса (недостаточная толщина, полип, кровотечение, другое) при низкой вероятности имплантации.
• При развитии гимерстимуляции или высоком риске ее возникновения и при необходимости отстрочить перенос, рекомендовано замораживание всех эмбрионов.
• Витрификация эмбрионов для последующего применения в программе суррогатного материнства.
• Внезапная болезнь женщины при запланированном переносе эмбрионов в цикле ЭКО.
• При сложностях синхронизации циклов женщины-реципиента и донора.
• Заморозка донорского материала.

Пациентке можно перенести в полость матки криоконсервированный (размороженный) эмбрион, не проводя повторную стимуляцию суперовуляции и пункцию яичников. При криоконсервации эмбрионов риск развития врожденных патологий плода не увеличивается.

Подготовка к переносу замороженных эмбрионов зависит от тактики, выбранной врачом. Обычно репродуктолог назначает гормональные препараты для подготовки организма женщины к предстоящей беременности.

В клинике «АльтраВита» была освоена и успешно внедрена технология витрификации. Услуга, дающая женщине необычайную свободу выбора — криоконсервация эмбрионов, цена при этом — это возможность обзавестись потомством, когда для этого буду созданы подходящие условия.

Что важно знать о криопротоколе

Перед осуществлением подсадки замороженных зародышей, необходимо исключить одну из причин неудачных попыток ЭКО называемую условно «трудной трансплантацией». Если в других протоколах возникали травмы шейки матки, проблемы с цервикальным каналом (загибы или стенозы), наблюдались выделения сразу же после внедрения, то перед подсадкой криоконсервированных зародышей рекомендовано произвести пробный перенос.

Пробная трансплантация — имитация всей процедуры от начала до конца, но без реального переноса эмбрионов. Он позволит произвести оценку возможностей организма, установит степень проходимости цервикального канала. С помощью пробного переноса можно наметить дальнейший план действий: как произвести трансфер (с использованием наркоза или без), узнать, как поведет себя организм во время процедуры.

Во многих клиниках пробную подсадку проводят в день проведения реального трансфера. Если все проходит успешно, то для удачного ЭКО остается лишь перенести зародыш в матку.

Преимущества криоконсервации:

• Предотвращает гибель жизнеспособных зародышей;
• В случае неудачи в других протоколах не нужно повторно проводить гормоны и стимулировать работу яичников. Организм не получит большую дозу препаратов.
• Процедура дешевле, чем стандартное ЭКО, поскольку многие этапы пропускаются (гормонотерапия, пункция).
• Если произошли отклонения от протокола, эмбрионы можно повторно заморозить до наступления удачного момента.

Крипротокол является успешным этапом в развитии эмбриологии. Однако не всегда зародыши оживают после криоконсервации. Примерно в 5%-10% случаев после разморозки они оказываются не способны развиваться дальше. Репродуктолог должен оценить состояние эмбрионов. Разумеется, предпочтение отдают зародышам без повреждений, однако, после криоконсервации таких остается очень мало. Это происходит и потому, что обычно в других протоколах подсаживают эмбрионы лучшего качества.